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The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus >
No.53 (2006/12) >

 
Title :Detection of Citrus Huanglongbing using an Iodo-starch Reaction
Title alternative :ヨウ素デンプン反応を利用したカンキツグリーニング病の検出
Authors :Taba, Satoshi
Nasu, Kanami
Takaesu, Kazuko
Ooshiro, Atsushi
Moromizato, Zen-ichi
Authors alternative :田場, 聡
那須, 奏美
高江洲, 和子
大城, 篤
諸見里, 善一
Issue Date :Dec-2006
Abstract :A rapid, low cost method for the detection of physiological changes associated with the causal agent of huanglongbing (greening) in citrus was developed. A leaf of citrus was cut into 5x5 mm pieces, crushed and softened with hot water for 10 min. A 100 μl sample of sap containing the infectious agent placed in a micro plate with 40 μl 5 mM iodine solution turned purple as a result of the iodo-starch reaction. Leaf samples from trees with deficiency symptoms gave a reaction ranging from light blue to blue, and healthy tree samples became yellow or brown, a result that distinguished diseased trees from healthy ones with the naked eye. Moreover, diseased samples had 20 times the optical absorbance as healthy ones at 540 nm. A comparison of PCR results with the iodo-starch assay resulted in 75% agreement for leaf samples, and 95% for trees.
本研究では低コストで,迅速に多量のサンプルを検定できるカンキツグリーニング病の検定法の開発を行った。まず,カンキツの葉を約5×5mm大にちぎって破砕し,これを10分間熱湯で糊化した後、その上清を100μl取ってマイクロプレートに入れ,これに5mMのヨウ素溶液を40μl添加すると,カンキツグリーニング病に罹病したサンプルはヨウ素デンプン反応により紫に,要素欠乏症状は淡い青~青色に,健全サンプルは,淡い青,黄または茶色に発色するため,肉眼での判別が可能であった。また波長540nmで吸光値を測定した結果,罹病サンプルは健全サンプルの20倍以上の吸光値を示した。PCRとヨウ素・デンプン反応による検定結果を比較した結果では,葉当たりでは75%,樹当たりでは95%の一致率を示した。
Type Local :紀要論文
ISSN :0370-4246
Publisher :琉球大学農学部
URI :http://hdl.handle.net/20.500.12000/607
Citation :琉球大学農学部学術報告 = The Science Bulletin of the Faculty of Agriculture. University of the Ryukyus no.53 p.19 -24
Appears in Collections:No.53 (2006/12)

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